Новости химической науки > Отражение от белковой поверхности даст новую информацию

Благодаря работе японских исследователей биохимики получили новый более дешевый инструмент для зондирования биомолекул.

Измеряя одновременно два различных физических свойства Йошио Окахата (Yoshio Okahata) и соавторы из Института Технологии Токио могут изучать степень гидратирования и вязкоупругие свойства белков.

Изменение степени отражения синего цвета от поверхности золота указывает на степень связывания полимера. (Рисунок: © Chem. Commun.)

В новом подходе для детектирования иммобилизации белка на поверхности используется чувствительный прибор для измерения массы – пьезоэлектрические кварцевые кристаллические микровесы. При протекании потока белкового раствора через QCM ковалентное связывание иммобилизует белок на активированной золотой поверхности кристалла QCM, меняя резонансную частоту кристалла. Однако в жидкой среде резонансная частота зависит не только от изменения массы, вызванной осаждением белка, но также от степени гидратирования и вязкоупругих свойства, что усложняет количественное определение белка.

Для преодоления этого препятствия Окахата комбинировал иммобилизацию белка с измерением изменения степени отражения синего цвета от поверхности золота. В то время как резонансная частота QCM меняется под воздействием ряда факторов, изменение отражательной способности зависит только от толщины, а, следовательно, и от массы иммобилизованного белкового слоя. Проведение параллельных измерений позволяет отделить изменения в резонансной частоте, вызванные привесом массы от изменений, связанных с гидратацией и вязкоэластичным состоянием, позволяя исследователям оценивать эффект гидратации на биомолекулярную абсорбцию.

Прежние методы связывания белков были основаны на комбинации QCM с методикой плазмонового резонанса, требующего сложного и дорогого оптического оборудования. Метод Окахаты проще и дешевле. Окахата отмечает, что новая система может быть использована для изучения других биомолекулярных взаимодействий.

Источник: Chem. Commun., 2007, 3574

метки статьи: #аналитическая химия, #биохимия, #физическая химия, #химия поверхности, #химия полимеров