Вопросы по спектрофлуориметрии/числа агрегации ПАВ в мицеллах

[Yulia_Sh]

Добрый день, коллеги.
Имеется у нас задача - определение чисел агрегации ПАВ в мицеллах. Имеется для этого прибор - спектрофлуориметр Cary Eclipse от Agilent.
Коллеги поделились методикой. Опишу вкратце. Берутся растворы ПАВ определенной концентрации, в них добавляется зонд (концентрация = const), и тушитель, его концентрация варьируется. Далее снимаются спектры, берется значение интенсивности третьего пика и считается отношение I3 (без тушителя)/I3(с тушителем). Собственно говоря, чем больше концентрация тушителя, тем меньше интенсивность сигнала. Строится зависимость натурального логарифма этого отношения от концентрации тушителя и по тангенсу угла наклона высчитывается число агрегации. Наиболее часто используемая пара зонд - тушитель - пирен - гексадецилпиридиний бромид. Их и используем. Длина волны возбуждения 335 нм. Используем концентрацию пирена 10^-6, тушителя - (6-28)^10(-5)
В чем собственно говоря проблема. Если берем растворы ПАВ не сильно выше ККМ ( примерно 70 мМ, что примерно составляет 10ККМ), все ок. Методика работает, получаем значения чисел агрегации сопоставимые с литературой. Как только берем более концентрированные растворы, скажем 250 мМ, получается ерунда. Интенсивность с тушителем становится больше, чем интенсивность без тушителя, соответственно отношение интенсивностей меньше единицы, а логарифм отрицательный...
Что пробовали сделать. Пробовали играть с временем выдержки растворов, пробовали варьировать концентрацию тушителя (в статьях мелькает, что она должна быть сопоставима с концентрацией ПАВ; подняли концентрацию, насколько позволяет растворимость гексадецилпиридиний бромида, до 10^-3). Результат все тот же.
В общем, если есть на форуме специалисты, что мы делаем не так? Поделитесь, пожалуйста, знаниями.
В принципе очень интересуют тонкости метода в применении к этой задаче.
Заранее спасибо.

[Yulia_Sh]

Коллеги, простите, позволю себе поднять тему...ни одного ответа. Может быть вопрос сформулирован непонятно?
Тушение флуоресценции. Есть специалисты???